循环游离核酸的主要特点和临床应用

组织基因分型是公认的癌症诊断金标准， 然而，这是一种对机体具有高侵袭性的方法，不适用于只有少量肿瘤组织、不适宜手术癌症患者的临床诊断或治疗方案的随访。

液体活检是一种基于对体液中生物标志物进行检测的新型检测方法。美国国家癌症研究所 （National Cancer Institute，NCI）将其定义为“在血液、其他体液或组织中发现的一种生物分子，它是正常或异常身体状态或疾病的标志”。

一个有用的生物标志物必须是稳定的（便于取存）且易于检测。理论上，所有体液都是液体活检生物标志物的合适来源。最常用的是血液，但尿液、脑脊液、唾液、牛奶、精浆、眼泪等也可以使用。液体活检的应用比组织活检有几个优点：取样程序更容易、更便宜、可重复性好。

游离核酸包括多种类型的DNA和RNA分子，这些分子通常都是细胞凋亡、坏死或者活性分泌时形成片段释放到血液当中。游离核酸在体液当中稳定存在，通常可以用PCR和测序的方法进行检测。越来越多的证据表明，游离核酸是癌症、心血管、神经疾病和糖尿病诊断、治疗评估和预后领域潜力巨大的生物标志物。

cfDNA（游离DNA）

游离核酸由于片段小、浓度低，对其进行检测和定量仍然具有挑战性，限制了它们在医学中的应用。

随着技术的进步，基于cfDNA的突变分析方法集中于两种主要方法：

（1）基于PCR的方法，针对DNA中的特定突变，这需要前期对DNA突变进行探索性研究和临床验证；

（2）外显子/基因组测序(WES，WGS)，可检测DNA中所有突变。

目前也存在多种检测cf-ncRNAs的方法。RNA-Seq利用二代测序（NGS）对cfRNA进行高通量分析，既适用于检测RNA的表达，又适用于发现新的RNA，是最敏感的miRNA、incRNA和circRNA鉴定和定量技术。但是这项技术耗时长、分析成本高，并且需要专业知识解读。微阵列核酸检测和分析也可以用于cfRNA的检测，可以对miRNAs和incRNAs进行快速、高通量的检测和定量。